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发布时间:2024-02-26 03:56:57   来源:亚博安卓-亚博平台app下载   阅览次数:58628次   

羟基脲(hydroxyurea)为dna合成抑制剂,经过10mm羟基脲提0min处理的细胞,绿色荧光阳性的细胞几乎完全消失,因此常被用作edu实验的阴性对照。配制好的click-it additive solution请根据每次用量适当分装后-20℃保存,避免反复冻融。click-it additive solution融化后有白色物质析出为正常现象,请上下颠倒几次,待全部溶解后使用。溶液一旦呈现棕色,则说明有效成分降解,不能再使用。皂苷促渗液可以用于全血及含红细胞的细胞悬液,以及其他含多种细胞类型的混合细胞悬液的通透。这种促渗液可以在裂解红细胞的同时,维持白细胞的光散射特性。本试剂盒做动物实验时可能需要更多的edu,请根据实验需求用合适稀释液稀释后使用。edu细胞增殖检测试剂盒的结构如何组成?河南正规edu细胞增殖检测试剂盒公司

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细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要指标。edu(5-ethynyl-2,-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(t)掺入正在复制的dna分子中,edu细胞增殖检测试剂盒通过基于edu与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有edu的dna上面,这样就可以进行高效快速的检测出dna复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、dna损伤修复等方面的研究。传统的免疫荧光染色(brdu)检测方法需要dna变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而edu检测方法不需要剧烈的dna变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、dna整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确。edu与胸腺嘧啶(t)结构非常相似,而edu染料大小只有brdu抗体的1/500,在细胞内很容易扩散,无需dna变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免样品损伤,而且无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更快速便捷地反映dna复制活性。edu细胞增殖检测试剂盒价格。

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按照以下的表格进行染色反应液的配制:染色反应液组分500μl1ml2ml5ml1×反应缓冲液430μl860μlmlml催化剂溶液20μl40μl80μl200μltamra红色荧光溶液μlμl5μlμl缓冲添加剂50μl100μl200μl500μl3、每孔加入100μl配置好的检测混合液,以覆盖细胞为宜,避光、室温孵育30分钟;4、弃染色反应液,加入100μltritonx-100细胞渗透液清洗2-3次,每次10分钟;5、弃细胞渗透液,用pbs洗两次,每次5分钟。dna染色1、将hoechst33342用rnase-free水溶液1:1000进行稀释得到终浓度为5μg/ml的1×hoechst染色液;2、每孔加入100μl1×hoechst染色液,室温避光孵育20-30分钟后,弃染色液;3、每孔加入100μlpbs洗细胞两次,去掉洗液。图像获取及分析建议染色完成后立即进行荧光显微镜拍照观察;如果条件限制,请于4°c条件下避光湿润保存3天之内完成拍照。若为细胞爬片或涂片,可使用抗荧光淬灭封片剂进行封片后于4°c条件下保存及拍照检测。你知道edu细胞增殖检测试剂盒的特点吗?河南正规edu细胞增殖检测试剂盒公司

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上海东寰生物科技有限公司即核苷渗入法。以前常用的核苷渗入法是brdu(胸腺嘧啶核苷酸类似物)法,但brdu法的缺点是需要变性dna后才能与抗体结合,导致了dna双链结构的破坏,影响了其他染料的结合染色,导致染色弥散,准确性降低等问题。edu法作为新型的核苷渗入法具有以下优点:安全—–不使用[3h]thymidine,无放射性污染。简单—–基于小分子化学反应的检测方法,简单高效,需三步:edu孵育;细胞固定;荧光检测。无需dna变性和孵育抗体。河南正规edu细胞增殖检测试剂盒公司

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