edu是一种胸腺嘧啶核苷类似物,分子量很小,在动物体内能够迅速扩散到各种组织和中,并渗入正在复制的dna分子,通过基于apollo®荧光染料与edu的特异性反应即可简单、快速、准确地检测出细胞增殖情况。与brdu检测方法相比,edu检测方法用量小得多,十分之一的用量即可获得与brdu检测试剂盒相同甚至更好的检测结果,而且小分子化学反应检测方法反应快,效率高,反应时间需几分钟,不需要dna变性、蛋白酶处理、抗原抗体过夜孵育,能够更好地保护细胞形态,更简单、更灵敏、更快速、更准确。edu细胞增殖检测试剂盒使用时要考虑什么问题?江西哪家公司提供edu细胞增殖检测试剂盒厂家
edu(5-溴-2-脱氧尿嘧啶)试剂盒是一种嘧啶类似物,可以在dna合成期整合入dna双链。通过以上原理图的对比,大家不难发现,edu法检测细胞增殖,无须抗体,无变性步骤,保持细胞形态和dna完整性,是一种简单,可靠,省事的创新方法。但是,现在依然有很多研究者们依然没有得到细胞增殖检测*行之有效,节约反应时间的方法。abbkine的edu检测试剂盒有两个型号,分别匹配的是两种不同的荧光通道,细胞增殖成像分析试剂盒(edu法)(绿色荧光),kta2030,488通道;细胞增殖成像分析试剂盒(edu法)(橘红色荧光),kta2031,549通道河南如何使用edu细胞增殖检测试剂盒哪家好edu细胞增殖检测试剂盒的基本结构级应用。
edu法中的点击反应原理图。掺入到细胞dna中的edu与荧光探针或生物素等标记的叠氮化物,在铜离子的催化下发生共价反应,形成稳定的三唑环,使细胞dna标记上荧光探针或生物素。细胞增殖检测是评估细胞活性、遗传毒性及抗药物效果等的基础实验手段。细胞增殖检测的方法按照原理通常可以分为五类:膜损伤检测、代谢活性检测、atp水平测定、dna合成检测和细胞荧光标记检测法。目前公认的精确的检测细胞增殖的方法是直接检测细胞中dna的合成
edu标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入edu溶液,制成2xedu标记培养基;(b)提前将2xedu标记培养基预热,然后等体积加入到细胞原有培养基中,获得lxedu溶液,其中edu的终浓度为10um;注:1)我们不建议替换全部培养基,因为这样可能会影响细胞增殖的速度;2)配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜;(c)每孔加入300ul含edu培养基孵育细胞2小时,弃培养基;注:1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态;2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxpbs清洗细胞两次,毎次5分钟,以除去未掺入dna的edu残留。注:贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。你知道edu细胞增殖检测试剂盒的特点吗?
可通过cellproliferationelisa,brdu(比色法.)或cellproliferationelisa,brdu(发光法)进行细胞群落中dna合成测定(brdubased)。优点是:实验结果同增殖细胞数目紧密相关,可一步完成细胞的温和固定和变性,操作方便稳定,不破坏细胞形态。5-bromo-2´-dulabeling/detectionkiti(荧光法)或kitii(ap)可使用试剂盒提供的brdu单抗,以及酶或荧光偶联二抗,检测单细胞水平的dna合成(brdubased)。前者通过免疫荧光检测,后者通过荧光显微镜检测。优点是:使用核酸酶变性dna,在不伤害细胞完整性的情况下使抗体结合brdu。edu细胞增殖检测试剂盒可以去哪里购买?江西口碑好的edu细胞增殖检测试剂盒价格
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另一方面,edu上的乙炔基能与生物素标记的叠氮化物(biotinlabeledazide)通过一价铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,该反应非常迅速,被称作点击反应(clickreaction),其反应原理参见图1。通过点击反应,新合成的dna会被相应的生物素探针所标记,从而可以使用适当的检测设备检测到增殖的细胞。图1.beyoclick™edu检测法中的点击反应(clickreaction)原理图。生物素或荧光探针等标记的叠氮化物(labeledazide)与掺入到细胞dna中的edu,在铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,终使细胞dna标记上生物素等探针。本试剂盒反应简单、检测灵敏度高。本试剂盒基于简单高效的点击反应,无需dna变性,只需少量的小分子叠氮化物探针即可非常有效地标记出掺入的edu,并且可以检测到单个细胞的增殖情况。江西哪家公司提供edu细胞增殖检测试剂盒厂家